iRGD-PEG-Mal,iRGD-聚乙二醇-马来酰亚胺的纯化与表征
iRGD-PEG-Mal,iRGD-聚乙二醇-马来酰亚胺的纯化与表征
iRGD-PEG-Mal是在iRGD-PEG链末端引入马来酰亚胺(Mal)基团,用于特异性结合巯基(-SH)。其纯化与表征流程如下:
纯化方法
固相合成粗产物处理:
iRGD肽通过Fmoc固相合成法制备,含Mal-PEG的偶联需在脱保护前完成。粗产物用**反相高效液相色谱(RP-HPLC)**纯化,流动相为乙腈-水(含0.1%TFA),梯度洗脱分离目标产物。
凝胶渗透色谱(GPC):
去除游离PEG、iRGD肽等小分子杂质,收集分子量匹配的iRGD-PEG-Mal馏分。
透析:
用去离子水透析(截留分子量3.5 kDa),去除盐类和有机溶剂,冻干得到白色粉末。
表征手段
质谱(MS):
MALDI-TOF MS:验证分子量,iRGD-PEG-Mal(PEG 2000)理论分子量约为2500-3000 Da,需与实测值吻合。
ESI-MS:检测电荷态分布,确认分子完整性。
核磁共振(NMR):
-¹H NMR验证Mal基团特征峰(如双键质子δ=6.7-6.9 ppm)和PEG链段(-CH₂-δ=3.6 ppm)。
紫外-可见光谱(UV-Vis):
Mal基团在260 nm处有特征吸收峰,用于定量分析。
巯基反应活性测试:
与模型巯基化合物(如谷胱甘肽)反应,通过Ellman试剂(DTNB)比色法检测结合效率,确保Mal基团活性>90%。
名称:iRGD-PEG-Mal,iRGD-聚乙二醇-马来酰亚胺
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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