Cy7-TF，CY7标记转铁蛋白的合成过程研究

Cy7-TF，CY7标记转铁蛋白的合成过程研究

CY7-Transferrin（CY7标记转铁蛋白，TF）是一种通过共价偶联将近红外荧光染料CY7标记于转铁蛋白分子上的功能性探针。转铁蛋白是一种铁结合糖蛋白，主要负责血液中铁离子的运输，同时具有特异性的转铁蛋白受体结合能力。在生物化学和药物递送研究中，CY7标记转铁蛋白不仅能够保持铁结合与受体识别功能，还提供近红外荧光信号，实现分子示踪、定位及定量分析。

合成过程研究

蛋白准备：

转铁蛋白需在适宜缓冲液中溶解（如PBS，pH 7.2–7.4），浓度一般为1–5 mg/mL。在此过程中，必须保持蛋白稳定性，防止聚集或变性。为了保证标记均一性，可先进行透析或离心去除杂质。

染料活化与选择：

CY7通常以NHS酯或马来酰亚胺形式提供，用于与蛋白表面的赖氨酸或半胱氨酸残基形成共价键。染料在干燥避光条件下溶解于适宜溶剂（如DMSO），加入蛋白溶液前需保证浓度准确。

偶联反应优化：

偶联反应通常在4–25℃条件下进行1–4小时，pH保持在7–8范围，以保证蛋白功能和荧光稳定性。反应中染料与蛋白摩尔比需适度控制（通常1:3–1:5），以平衡荧光信号与蛋白生物活性。柔性PEG链可作为衔接剂，减少荧光猝灭，同时避免干扰转铁蛋白受体结合位点。

纯化与分离：

偶联完成后，通过透析、凝胶过滤（如Sephadex G-25或G-50）或超滤去除未反应的CY7染料，以获得纯净的标记蛋白。进一步可通过高效液相层析（HPLC）分析标记密度和均一性，确保产品适用于高精度实验。

表征与稳定性评估：

光谱分析：检测转铁蛋白血红素吸收峰及CY7近红外吸收峰，验证标记成功。

荧光测定：激发约750 nm，测定发射约770–780 nm，确认荧光活性。

蛋白功能验证：检测受体结合能力和铁结合能力，确保功能保留。

长期稳定性：在不同温度、pH及避光条件下评估荧光和蛋白稳定性，保证实验可重复性。

产品名称：Cy7-TF，CY7标记转铁蛋白

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc