CY7-Histone，CY7标记组蛋白的合成策略

CY7-Histone，CY7标记组蛋白的合成策略

CY7-Histone（CY7标记组蛋白）是一种将近红外荧光染料CY7共价标记于组蛋白分子上的功能性探针。组蛋白是细胞核内的碱性蛋白质，作为核小体的核心蛋白，参与DNA包装、染色质重塑及基因表达调控。通过CY7标记，组蛋白不仅获得可视化荧光信号，还能保持其与DNA结合能力及核小体组装特性，为化学、分子生物学及表面功能化研究提供实验工具。

结构与合成策略

蛋白来源与纯化：

组蛋白可从核酸结合蛋白提取，或通过重组技术在大肠杆菌中表达。重组组蛋白需纯化至高纯度（≥95%），通常使用离子交换层析和凝胶过滤步骤去除杂质，以保证后续标记的均一性。

染料选择与活化：

CY7-NHS酯或马来酰亚胺衍生物用于标记蛋白赖氨酸或半胱氨酸残基。选择适宜的衔接化学基团，如柔性PEG链，可减小荧光猝灭并保持组蛋白与DNA结合位点的功能完整性。

偶联反应条件：

偶联反应在缓冲液中进行，pH一般为7–8，温度控制在4–25℃。蛋白与染料摩尔比需适度，以平衡标记密度与蛋白功能。反应时间通常为2–4小时。标记过程中需避免过量染料引起蛋白聚集或活性降低。

纯化与去除游离染料：

完成偶联后，通过透析、凝胶过滤（如Sephadex G-25）或超滤去除未结合的CY7染料，获得纯净的标记组蛋白。HPLC分析可进一步确认标记均一性及标记密度。

结构与功能表征：

光谱分析：检测组蛋白吸收及CY7近红外荧光吸收峰，确认标记成功。

荧光测定：利用750 nm激发测定770–780 nm发射，验证荧光活性。

DNA结合能力：通过电泳迁移率分析或染色质重组实验，确认标记组蛋白保留结合功能。

核小体组装验证：与DNA组装核小体，并观察荧光分布，评估标记对结构的影响。

产品名称：CY7-Histone，CY7标记组蛋白

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc