Cy5-tetrazine，花菁染料CY5标记四嗪的纯化与表征分析

Cy5-tetrazine，花菁染料CY5标记四嗪的纯化与表征分析

四嗪（Tetrazine）是一类具有高度反应活性的杂环化合物，应用于生物正交化学和荧光标记。将Cy5与四嗪偶联形成Cy5-tetrazine，可实现荧光标记与生物分子正交偶联反应，用于生物成像、蛋白标记及材料功能化研究。

纯化与表征分析：

偶联及反应条件：

Cy5-tetrazine可通过Cy5-NHS酯或Cy5-maleimide与含有胺或巯基的四嗪前体偶联。

偶联反应通常在室温或略低温下进行，以水性或混合有机缓冲液为体系。

反应温和，避免四嗪降解，同时保证Cy5荧光性能。

纯化方法：

高效液相色谱（HPLC）：通过反相HPLC可分离未反应的Cy5、四嗪前体及Cy5-tetrazine标记产物，确保产物纯度>95%。

透析或超滤：可去除小分子杂质及未偶联的Cy5分子，尤其适用于水溶性体系。

柱层析：在有机溶剂体系中，可通过硅胶或C18柱对偶联产物进行进一步分离。

表征方法：

质谱分析（MS）：验证Cy5-tetrazine分子量，确认偶联是否完成。

核磁共振（NMR）：对偶联结构及四嗪环完整性进行验证，确保化学结构符合设计。

紫外-可见光与荧光光谱：检测Cy5吸收峰与发射峰，评估荧光强度和标记效果。

薄层色谱（TLC）：可快速评估偶联进程与纯化效果。

稳定性与储存：

Cy5-tetrazine需低温避光保存，避免荧光猝灭和四嗪降解。

储存于干燥或缓冲液中，可维持结构稳定性和反应活性。

对水分敏感，需避免长时间暴露在潮湿环境中。

产品名称：Cy5-tetrazine，花菁染料CY5标记四嗪

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc