Cy5-COOH,1032678-07-1,花菁染料CY5标记羧酸的合成步骤概述
Cy5-COOH,1032678-07-1,花菁染料CY5标记羧酸的合成步骤概述
Cy5-COOH是一种以花菁染料Cy5为核心、末端含羧酸功能基团的荧光标记化合物。其末端羧基可进一步与氨基、羟基或其他活性基团发生共价偶联,实现生物分子或材料的功能化。Cy5-COOH应用于荧光探针制备、生物标记及化学偶联研究。
合成步骤概述:
核心染料合成:
首先合成Cy5核心结构,包括两端苯基和吡咯啉环,通过缩合反应形成共轭体系。
在共轭体系中引入可反应官能团(如氨基、羟基),为后续羧基修饰提供位点。
此阶段需控制温度和反应时间,以保证荧光特性不受破坏。
羧酸基团引入:
通过酯化或酰化反应将羧酸前体偶联到Cy5核心上。
常用策略包括用羧酸活化剂(如EDC/NHS)将羧基转化为活化酯,再与Cy5上的活性位点反应形成稳定的酰胺或酯键。
反应在缓冲溶液或有机溶剂中进行,pH略偏中性至弱碱性,以维持荧光染料稳定性。
偶联调控与保护策略:
为防止多位点修饰,可采用保护基团策略临时屏蔽非目标位点。
通过摩尔比控制,调节羧基标记度,避免荧光猝灭或分子间交联。
纯化与收集:
反应完成后,通过反相高效液相色谱(HPLC)或柱层析分离目标产物。
去除未反应的Cy5染料或多余羧酸,实现高纯度产品 (>95%)。
产品通常为深蓝色固体或油状物,溶于有机溶剂和缓冲液中,便于后续偶联应用。
表征方法:
通过质谱(MS)验证分子量与结构完整性。
核磁共振(NMR)用于确认羧酸官能团的成功引入。
紫外-可见光谱及荧光光谱用于检测吸收和发射性能,确保荧光特性保持稳定。
产品名称:Cy5-COOH
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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仅用于科研,不能用于人体。小编axc