CY7-Phytohaemagglutinin P，花菁染料CY7标记植物血球凝集素的合成过程研究

CY7-Phytohaemagglutinin P，花菁染料CY7标记植物血球凝集素的合成过程研究

CY7-Phytohaemagglutinin P（CY7-PHA-P）是一种将近红外荧光染料CY7共价偶联到植物血球凝集素P（PHA-P）分子上的多功能标记蛋白。PHA-P为植物来源的糖蛋白，能够特异识别细胞表面糖链并诱导血球凝集，常用于免疫学研究和细胞分选实验。CY7标记赋予PHA-P可视化功能，可在体内/体外实时追踪其分布和结合特性。

合成过程研究

PHA-P活性位点分析

PHA-P分子含有多个赖氨酸残基及少量半胱氨酸残基，可作为共价偶联位点。

为保证蛋白活性，标记反应需优先选择不干扰糖结合位点的赖氨酸或非活性巯基。

CY7活性基团设计

CY7通常以NHS酯形式存在，可与PHA-P赖氨酸的氨基形成酰胺键。

对于巯基特异标记，可使用Maleimide-CY7与蛋白巯基形成稳定硫醚键。

偶联反应条件优化

反应在温和缓冲条件（如PBS，pH 7.2–8.0）下进行，避免蛋白变性或糖结构破坏。

温度控制在4–25℃，反应时间2–12小时，可通过调整CY7与PHA-P摩尔比控制标记密度。

反应机理

NHS酯与蛋白氨基的亲核攻击生成稳定酰胺键。

Maleimide与蛋白巯基的Michael加成反应生成稳定硫醚键。

共价键的形成保证CY7牢固结合，荧光信号稳定，不易脱落。

纯化与分析

偶联产物通过透析、凝胶过滤或离心柱分离，去除自由CY7。

荧光光谱、UV-Vis光谱检测标记效率，SDS-PAGE分析蛋白分子量变化，确认偶联均一性。

功能性验证通过血球凝集实验或细胞结合实验，确保PHA-P糖结合活性保留。

研究意义与应用

CY7-PHA-P可用于免疫细胞追踪、糖链识别及体内荧光成像研究。

通过优化偶联条件与标记密度，可兼顾蛋白活性和荧光强度，为细胞分选和分子成像提供可靠工具。

产品名称：CY7-Phytohaemagglutinin P

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc