CY7-TF，花菁染料CY7标记转铁蛋白的原理与步骤

CY7-TF，花菁染料CY7标记转铁蛋白的原理与步骤

CY7-TF是一种通过将近红外荧光染料CY7共价偶联到转铁蛋白（Transferrin, TF）分子上形成的功能化蛋白复合物。转铁蛋白是一种血浆糖蛋白，能够高效结合和转运铁离子，并通过转铁蛋白受体介导细胞摄取。CY7标记赋予TF近红外荧光功能，可用于体内成像、细胞摄取及靶向输送研究。

结构合成原理与步骤

转铁蛋白结构特点

TF为单体或二聚体糖蛋白，含有赖氨酸和少量半胱氨酸残基，是共价偶联的主要靶点。

铁结合位点位于蛋白内腔，不参与表面偶联，可保持蛋白功能完整。

CY7活性衍生物设计

常用CY7-NHS酯或CY7-Maleimide进行标记。

NHS酯通过亲核攻击与TF赖氨酸氨基形成酰胺键；Maleimide可与巯基形成硫醚键。

偶联反应条件

在缓冲液（如PBS，pH 7.2–8.0）中进行，温和条件防止蛋白变性。

CY7与TF的摩尔比根据标记密度优化，避免过度标记影响铁结合活性。

反应时间通常为2–6小时，温度控制在4–25℃。

共价键形成机制

NHS酯与蛋白表面赖氨酸氨基的亲核攻击生成稳定酰胺键。

Maleimide与巯基通过Michael加成反应形成稳定硫醚键。

共价键稳定，使CY7牢固结合于TF分子，不易在体内脱落。

纯化与验证

通过透析、凝胶过滤或离心柱去除未反应的自由CY7。

荧光光谱确认CY7标记成功；SDS-PAGE分析蛋白分子量变化，确认偶联均一性。

功能验证通过铁结合实验或细胞摄取实验，确保TF活性保留。

产品名称：CY7-TF，花菁染料CY7标记转铁蛋白

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc