Alexa Fluor 700链霉亲和素 ，Alexa Fluor 700 Streptavidin的结构合成过程

Alexa Fluor 700链霉亲和素 ，Alexa Fluor 700 Streptavidin的结构合成过程

Alexa Fluor 700 链霉亲和素（Alexa Fluor 700 Streptavidin）是一种将荧光染料 Alexa Fluor 700（AF700）与链霉亲和素（Streptavidin）共价偶联形成的生物标记分子，结合了近红外荧光特性和 Streptavidin 高亲和力结合生物素的能力。AF700 的激发波长约为 696 nm，发射波长约为 719 nm，具有低背景、高信噪比和良好的光稳定性。Alexa Fluor 700 Streptavidin 在分子成像、免疫检测和多通道荧光实验中广泛应用，其结构设计与合成方法是实现其高功能性与稳定性的关键。

Alexa Fluor 700 Streptavidin 的结构主要由三个部分组成：荧光基团、连接桥和 Streptavidin 蛋白核心。AF700 作为荧光染料，具有共轭芳香环结构和电子离域体系，使其在近红外波段产生强烈荧光信号。为了实现与蛋白质共价偶联，AF700 通常通过 N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS ester）活化形式提供，使其羧基官能团能够与 Streptavidin 表面赖氨酸的氨基发生亲核加成反应。Streptavidin 是四聚体蛋白，每个亚基含有赖氨酸残基和四个高亲和力的生物素结合位点，为偶联和后续生物素结合提供结构基础。

在结构合成过程中，首先将 AF700 NHS ester 与 Streptavidin 在温和缓冲液中反应。通常使用 pH 7.4–8.5 的磷酸盐或碳酸盐缓冲体系，使蛋白质保持天然构象，同时保证酰胺键形成效率。荧光染料通过 NHS ester 与蛋白质赖氨酸的氨基共价结合，形成稳定的酰胺键，使染料牢固附着在蛋白质上。此步骤的反应时间、摩尔比和温度需精确控制，以确保每个 Streptavidin 分子获得适当数量的染料负载，同时避免蛋白质结构受损或染料聚集。

偶联完成后，产物需通过纯化步骤去除未反应染料和副产物。常用方法包括凝胶过滤、透析或亲和层析。凝胶过滤利用分子量差异将游离染料与蛋白偶联物分离，透析通过半透膜排除小分子杂质，亲和层析可进一步去除失活或聚集蛋白。纯化后的 Alexa Fluor 700 Streptavidin 具有高纯度、良好水溶性和稳定性，可在多种生物体系中使用。

结构表征是验证偶联成功及功能完整的重要环节。紫外-可见光谱测定染料的吸收峰，可估算染料负载数（Dye-to-Protein Ratio，D/P）；荧光光谱确认近红外荧光性能是否保持；SDS-PAGE 结合荧光扫描验证蛋白质完整性和染料附着情况。此外，生物功能表征通常通过生物素结合实验，如与生物素标记抗体或颗粒结合，并检测荧光信号，验证 Streptavidin 的高亲和力是否保留。

产品名称：Alexa Fluor 700链霉亲和素 

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

产品目录

二磺酸吲哚菁绿标记氨基 diSulfo-ICG-NH2

二磺酸吲哚菁绿标记叠氮 diSulfo-ICG-N3

二磺酸吲哚菁绿标记炔烃 diSulfo-ICG-alkyne

谷胱甘肽S移换酶，GST，荧光探针

仅用于科研，不能用于人体。小编axc