CF 620R Tyramide Conjugates,CF 620R 酪胺偶联物的合成步骤概述
CF 620R Tyramide Conjugates,CF 620R 酪胺偶联物的合成步骤概述
CF 620R Tyramide Conjugates,中文名称可表述为 CF 620R 酪胺偶联物,是一类将 CF 620R 荧光染料与酪胺(Tyramide)化学偶联形成的活性分子。CF 620R 为红色荧光染料,吸收峰约在 620 nm,发射峰约在 650 nm,具有高量子产率、良好光稳定性和狭窄发射谱带,适合多重荧光标记实验。酪胺偶联物广泛应用于免疫组化增强信号的 tyramide signal amplification(TSA)技术中,可通过过氧化物酶催化在目标分子附近生成共价标记,实现高灵敏度检测。CF 620R Tyramide Conjugates 的合成主要基于酪胺与活化荧光染料的偶联反应。
合成步骤概述如下:
活化荧光染料
CF 620R 荧光染料通常以羧基形式提供,为实现酪胺偶联,需要先将羧基活化。常用方法是将 CF 620R 转化为 N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)酯或类似活性酯形式,使羧基碳原子具有高度亲电性,便于与酪胺的伯氨基形成共价酰胺键。活化过程通常在干燥、惰性有机溶剂(如 DMSO 或 DMF)中进行,并加入碱性条件(如二异丙基乙胺)促进 NHS 酯形成。酪胺准备与保护
酪胺分子含有自由伯氨基和苯环羟基官能团。在偶联反应中,伯氨基是主要的亲核反应位点。若酪胺分子上存在其他活性官能团,需要通过保护基策略暂时保护,避免副反应干扰。保护基选择应在偶联反应完成后可温和去除,保证最终产物功能完整。偶联反应
CF 620R NHS 酯与酪胺在有机溶剂或缓冲体系中反应,伯氨基对羧碳进行亲核攻击,生成稳定的酰胺键。反应通常在室温至略高温(20–30 ℃)下进行,避光操作以防止染料光漂白。反应时间根据反应物浓度和体系条件控制,一般为数小时至过夜,确保偶联充分。反应终止与粗分离
偶联反应完成后,体系中含有未反应的染料、未偶联酪胺以及偶联副产物。可通过水溶缓冲液稀释或加入小分子捕获剂终止反应。粗分离步骤通常采用凝胶过滤、透析或初步柱色谱,去除小分子杂质和未反应的染料,提高产物纯度。精制与纯化
为获得高纯度 CF 620R Tyramide Conjugates,可采用高效液相色谱(HPLC)精制。常用反相 C18 色谱柱,以水-乙腈梯度体系进行分离,并加入低浓度酸(如三氟乙酸或乙酸)改善峰形。荧光检测器监测流出峰,对应产物的荧光吸收发射特性可用于收集纯化物。去保护与产物稳定化
若酪胺偶联中使用了保护基,精制后需进行去保护处理,以恢复酪胺的伯氨基和酚羟基功能。去保护通常在温和条件下完成,以避免荧光染料或酪胺结构损伤。最终产物可冻干储存,在低温、避光条件下保持长期稳定性。产物表征与功能验证
纯化后的 CF 620R Tyramide Conjugates 可通过 UV-Vis 光谱和荧光光谱验证染料偶联成功,质谱分析(MALDI-TOF 或 ESI-MS)确认分子量,HPLC 检测纯度。功能性验证可通过过氧化物酶催化的 TSA 实验,观察荧光信号增强效果,以确保偶联产物在实际生物标记中的有效性。
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产品名称:CF 620R Tyramide Conjugates
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
厂家:良林生物

产品目录
花菁染料CY5.5标记奥沙利铂 CY5.5-Oxaliplatin 61825-94-3
花菁染料CY5.5标记靶向RGD多肽脂质体 CY5.5-MAL-RGD
花菁染料CY5.5标记丙烯酸酯 CY5.5-DA
花菁染料CY5.5标记藏红花 CY5.5-saffron
仅用于科研,不能用于人体。小编axc