CF488A Tyramide Conjugates，CF488A 酪胺偶联物的合成过程研究
CF488A Tyramide Conjugates，CF488A 酪胺偶联物的合成过程研究
CF488A Tyramide Conjugates，中文名称可表述为 CF488A 酪胺偶联物，是一类将绿色荧光染料 CF488A 与酪胺（Tyramide）通过共价偶联形成的功能性分子。CF488A 具有吸收峰约 490 nm，发射峰约 515 nm，量子产率高、光稳定性好，适合多重荧光成像实验。酪胺偶联物可在过氧化物酶（HRP）催化下生成自由基中间体，在目标分子附近共价结合，广泛应用于 tyramide signal amplification（TSA）技术中，用于增强免疫组化信号、提高检测灵敏度。CF488A Tyramide Conjugates 的合成过程研究主要集中在偶联化学、反应条件控制和纯化策略上。
合成过程研究概述如下：
荧光染料活化
CF488A 通常以羧基形式提供，需要将羧基活化以便与酪胺形成共价键。最常用方法是将羧基转化为 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）酯或类似活性酯，使羧碳高度亲电。活化步骤通常在干燥有机溶剂（如 DMSO、DMF）中进行，并加入适量碱性催化剂（如二异丙基乙胺）促进反应生成活性酯。活性化过程需要控制温度、溶剂干燥度以及反应时间，以获得高转化率的活性染料中间体。酪胺的准备与官能团保护
酪胺分子含有伯氨基和苯酚羟基，偶联反应主要发生在伯氨基上。若酪胺分子上存在其他活性官能团，为避免副反应，需要采用适当的保护基策略，例如对酚羟基或其他敏感位点进行可控保护。保护基应在偶联完成后易于去除，确保最终产物保留全部活性。偶联反应
CF488A NHS 酯与酪胺在缓冲体系或有机-水混合溶剂中反应，伯氨基对羧碳进行亲核攻击，生成稳定的酰胺键。反应一般在室温或略高温（20–30 ℃）下进行，避免光照以保护荧光染料稳定性。反应时间根据反应物浓度和体系条件控制，从数小时到过夜不等，以确保偶联充分。反应终止与初步分离
偶联反应结束后，体系中含有未反应染料、未偶联酪胺以及副产物。可以通过加入水溶缓冲液稀释或低分子捕获剂终止反应。初步分离通常采用凝胶过滤或透析，利用分子量差异去除小分子杂质和未反应染料，获得粗纯化的偶联物。精制与纯化
为获得高纯度的 CF488A Tyramide Conjugates，可采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）精制。C18 色谱柱常用于分离，流动相为水-乙腈梯度体系，加入少量酸（如三氟乙酸或乙酸）改善峰形。通过荧光检测器监测流出峰，收集对应 CF488A 荧光信号的纯化产物。HPLC 精制能够去除杂质和偶联副产物，提高最终产物纯度和应用可靠性。去保护与产物稳定化
若偶联过程中使用了保护基，需要在精制后进行去保护处理，恢复伯氨基和酚羟基功能。去保护条件温和，以避免破坏荧光染料结构或酪胺活性。最终产物通常冻干保存，避光低温储存以保证长期稳定性。产物表征与验证
偶联产物可通过 UV-Vis 光谱和荧光光谱确认染料偶联成功，质谱（MALDI-TOF 或 ESI-MS）分析验证分子量，HPLC 检测纯度。功能性验证可通过 HRP 催化的 TSA 实验，观察目标分子区域的荧光增强效果，以确认产物在实际生物标记中的有效性。
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产品名称：CF488A Tyramide Conjugates
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研
厂家：良林生物
产品目录
花菁染料CY5.5标记穿心莲内酯 CY5.5-Andrographolide
花菁染料CY5.5标记雌二醇 CY5.5-E2
花菁染料CY5.5标记丹皮酚 CY5.5-Paeonol
花菁染料Cy5.5标记单磺酸 Cy5.5-Acid，monosO3，
仅用于科研，不能用于人体。小编axc