Cyanine 5 Tyramide Conjugates，花青素 5 酪胺偶联物的结构合成
Cyanine 5 Tyramide Conjugates，花青素 5 酪胺偶联物的结构合成
Cyanine 5 Tyramide Conjugates，中文名称可表述为 花青素 5 酪胺偶联物，是一类将 Cyanine 5（Cy5）荧光染料与酪胺（Tyramide）通过共价偶联形成的功能性分子。Cy5 是一种红色荧光染料，吸收峰约在 649 nm，发射峰约在 670 nm，具有高量子产率、良好光稳定性和较窄发射谱带，广泛应用于荧光标记、细胞成像及多重标记实验。酪胺偶联物在过氧化物酶（HRP）催化下可生成自由基中间体，在目标分子附近共价结合，实现信号放大（TSA，tyramide signal amplification），用于高灵敏度免疫组化检测。Cy5 Tyramide Conjugates 的结构设计和合成策略为实现高效偶联和稳定荧光提供了基础。
结构特点：
荧光核心结构
Cyanine 5 荧光染料由两个吲哚或苯并吲哚环通过共轭亚甲基桥联形成 π 共轭体系，赋予其长波长吸收和红色荧光发射。共轭结构的稳定性使其具有良好的光学性能，包括高量子产率、光稳定性强以及可在多色成像实验中与其他染料区分。Cy5 核心上通常带有羧基或其他活性官能团，便于进一步化学修饰。酪胺官能团
酪胺分子含有苯环羟基和伯氨基，伯氨基是主要的亲核位点，能够与染料活性酯形成稳定的酰胺键。苯环羟基在 HRP 催化条件下可生成自由基，实现 TSA 技术的信号放大功能。酪胺的选择性反应性确保偶联的高特异性，并在偶联后保持其在酶催化下的功能活性。偶联桥联设计
Cy5 与酪胺通过柔性链段或直接酰胺键偶联。柔性链段可以减少荧光染料对酪胺分子或标记靶的空间位阻影响，保证标记后分子仍能高效与目标结合，同时提高在生物体系中的溶解性和分散性。
合成概述：
荧光染料活化
Cy5 通常以羧基形式提供，通过与 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）或其他活化剂反应生成 Cy5 NHS 酯或活性酯。活化步骤在干燥有机溶剂（如 DMSO、DMF）中进行，加入适量碱性催化剂（如二异丙基乙胺）促进生成高反应活性的中间体。活性化的 Cy5 为后续与酪胺的共价偶联提供亲电中心。酪胺准备与保护
酪胺分子可能需要对羟基或其他敏感官能团进行暂时保护，确保偶联过程中伯氨基的选择性反应。保护基应易于在偶联完成后温和去除，避免破坏荧光染料或酪胺活性。偶联反应
Cy5 NHS 酯与酪胺伯氨基在缓冲体系或有机-水混合溶剂中反应，形成稳定的酰胺键。反应条件温和（室温或略高温），避光操作，反应时间通常数小时至过夜，以确保偶联充分。粗分离与精制
偶联完成后，体系中含有未反应染料、未偶联酪胺及副产物。可采用凝胶过滤或透析去除小分子杂质，初步分离偶联物。随后使用高效液相色谱（RP-HPLC）精制产物，C18 色谱柱、水-乙腈梯度体系，低浓度酸改善峰形，荧光检测器监测对应产物峰进行收集。去保护与产物稳定化
若反应中使用保护基，精制后进行去保护处理，恢复伯氨基和酚羟基功能。最终产物冻干保存，低温避光储存以保证长期稳定性和荧光性能。表征与验证
纯化后，可通过 UV-Vis 光谱和荧光光谱验证荧光染料偶联成功，质谱（MALDI-TOF 或 ESI-MS）分析确认分子量，HPLC 检测纯度。功能验证可通过 HRP 催化的 TSA 实验，观察目标分子区域的荧光信号增强，确保偶联物在生物实验中具有高活性和可视化效果。
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产品名称：Cyanine 5 Tyramide Conjugates
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研
厂家：良林生物
产品目录
花菁染料CY5.5标记胆碱 CY5.5-choline
花菁染料CY5.5标记刀豆蛋白A CY5.5-ConA
花菁染料CY5.5标记叠氮 Cy5.5-N3
花菁染料CY5.5标记鹅去氧胆酸 CY5.5-CDCA
仅用于科研，不能用于人体。小编axc