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BHQ-1 azide,BHQ-1叠氮,非发光淬灭剂衍生物的纯化与表征

2025-12-02 分享

BHQ-1 azide,BHQ-1叠氮,非发光淬灭剂衍生物的纯化与表征

BHQ-1 azide(BHQ-1叠氮)是一种非发光淬灭剂衍生物,属于Black Hole Quencher系列,广泛应用于荧光探针、分子成像和生物材料功能化研究中。BHQ-1本身为高度共轭的芳香体系,能够有效吸收可见光波段荧光染料的能量而不发射光,实现非辐射淬灭。BHQ-1叠氮通过在分子末端引入叠氮(–N₃)官能团,赋予其生物正交化学反应活性,可与含环辛炔(Cyclooctyne)或其他叠氮点击化学官能团的分子进行高效共价偶联,广泛用于FRET探针、核酸标记及纳米载体表面功能化。

化学特性

BHQ-1 azide分子主要由三部分组成:淬灭核心、连接链和末端叠氮官能团。淬灭核心提供宽带吸收(约480–580 nm),保证在FRET体系中高效淬灭荧光信号。叠氮基团为亲电子活性位点,参与铜自由点击化学(Copper-free Click Chemistry)或经典的叠氮-炔环点击反应,实现与TCO(trans-cyclooctene)或环炔修饰分子的高选择性共价结合。柔性连接链保证淬灭核心与反应位点的空间隔离,避免淬灭效率受影响,同时保持分子溶解性和稳定性。

纯化方法

BHQ-1 azide的纯化主要通过以下几种方式进行,以获得高纯度、可控反应活性的产物:

  1. 高效液相色谱(HPLC)
    使用反相高效液相色谱(RP-HPLC)是纯化BHQ-1 azide的主要方法。采用C18柱,流动相常为水-乙腈(含0.1%甲酸或三氟乙酸),通过梯度洗脱分离杂质和未反应前体。BHQ-1 azide在HPLC中通常表现为单一峰,保留时间可作为纯度判定依据。

  2. 薄层色谱(TLC)
    对于初步检测,TLC可用于监控合成反应进度和产物纯度。通过紫外或染料显色方法,可对BHQ-1 azide与反应杂质进行区分。

  3. 透析或凝胶过滤
    在水溶体系中,BHQ-1 azide可通过透析或凝胶过滤去除小分子副产物或反应试剂残留,尤其适用于生物实验前的样品处理,保证产物的水溶性和生物兼容性。

表征方法

  1. 质谱(MS)
    质谱是确认BHQ-1 azide分子量和结构完整性的核心手段。通过MALDI-TOF或ESI-MS,可精确检测分子量,与理论值比较判断纯度和分子完整性。

  2. 核磁共振(NMR)
    ^1H-NMR和^13C-NMR可用于确认叠氮基团的引入及分子结构完整性。叠氮基团在^1H-NMR中不产生明显信号,但通过邻近质子化学位移变化可间接确认。

  3. 紫外-可见光吸收光谱(UV-Vis)
    BHQ-1淬灭核心具有宽带吸收特性,可通过UV-Vis光谱确认分子存在及浓度,同时评估溶液中的杂质比例。

  4. 薄层/高效液相色谱纯度检测
    除HPLC纯化外,可使用UV或荧光检测确认产物纯度,确保用于实验体系的BHQ-1 azide无杂质。

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产品名称:BHQ-1 azide

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

厂家:良林生物

BHQ-1 azide

产品目录

CY2标记精氨酸 CY2-Arginine

CY2标记菊粉 CY2-inulin

CY2标记卡泊三醇 CY2-Calcipotriol

CY2标记磷酸三苯酯 CY2-TPP

CY2标记氯霉素 CY2-Chloramphenicol

仅用于科研,不能用于人体。小编axc