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BHQ-1 Mal 荧光淬灭剂BHQ-1马来酰亚胺应用于FRET(荧光共振能量转移)体系

2025-12-02 分享

BHQ-1 Mal 荧光淬灭剂,BHQ-1马来酰亚胺应用于FRET(荧光共振能量转移)体系

BHQ-1 Mal(Black Hole Quencher-1 Maleimide,BHQ-1马来酰亚胺)是一种高效非发光荧光淬灭剂,广泛应用于FRET(荧光共振能量转移)体系、分子探针设计和生物材料功能化。BHQ-1分子本身由高度共轭的芳香体系组成,能够有效吸收多种可见光波段荧光染料发射的能量而不发射光,实现非辐射淬灭。马来酰亚胺(Maleimide)官能团赋予BHQ-1选择性与巯基(–SH)反应的能力,可与蛋白质、肽、多肽或其他巯基修饰分子形成稳定的硫醚键,从而构建可控的淬灭体系和荧光探针。

化学特性

BHQ-1 Mal分子结构主要包括淬灭核心、柔性连接链和末端马来酰亚胺基团。淬灭核心的共轭芳香结构提供宽带吸收(约480–580 nm),保证在FRET体系中高效淬灭荧光信号。柔性连接链隔离淬灭核心与活性基团,减少对荧光染料的直接干扰,同时提供空间自由度,使马来酰亚胺易于与目标分子上的巯基结合。马来酰亚胺在中性或弱碱性条件下可快速与游离巯基反应,生成稳定的硫醚键,保证偶联产物化学稳定性和实验重复性。

合成步骤概述

BHQ-1 Mal的合成通常包括以下几个关键步骤:

  1. BHQ-1羧酸前体制备
    合成BHQ-1 Mal的第一步是制备BHQ-1羧酸衍生物,保证分子末端含有可活化的羧基官能团。BHQ-1酸在适当有机溶剂(如DMF、DMSO)中溶解,利用羧基保护和活化方法,获得稳定的前体,为后续与马来酰亚胺偶联提供反应位点。

  2. 活化羧基
    羧基通常通过N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化或使用碳二亚胺类试剂(如EDC)生成高反应性的中间体。此步骤将羧基转化为亲电子中心,便于马来酰亚胺胺基或其他活性基团进行亲核进攻,形成共价连接。

  3. 马来酰亚胺偶联
    活化后的BHQ-1羧酸与马来酰亚胺胺基在干燥、无水溶剂条件下反应,形成稳定的酰胺键,将马来酰亚胺成功引入分子末端。该步骤通常在温和条件下进行(室温或轻微加热),避免芳香淬灭核心降解或马来酰亚胺环断裂。反应完成后,通过薄层色谱(TLC)或高效液相色谱(HPLC)监控反应进度。

  4. 纯化与分离
    合成产物通常含有未反应前体、过量试剂及副产物,需要通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)纯化。HPLC条件可采用C18柱,梯度洗脱水-乙腈体系(含微量酸性调节剂,如0.1%甲酸),收集BHQ-1 Mal纯化峰。透析或凝胶过滤也可用于去除低分子量杂质。

  5. 表征
    纯化后的BHQ-1 Mal通过质谱(MS)、核磁共振(NMR)及紫外-可见光谱(UV-Vis)表征,确认分子量、结构完整性及淬灭核心的光学特性。HPLC可进一步验证纯度,确保产物可用于高效偶联和荧光淬灭实验。

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产品名称:BHQ-1 Mal 

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

厂家:良林生物

BHQ-1 Mal

产品目录

CY2标记莫能菌素 CY2-Monensin

CY2标记葡萄糖酸 CY2-Gluconic acid

CY2标记葡萄糖氧化酶 CY2-Glucose oxidase

CY2标记琼脂 CY2-Agarose

仅用于科研,不能用于人体。小编axc