BHQ-1 NHS，BHQ-1活化酯应用于荧光探针设计

BHQ-1 NHS，BHQ-1活化酯应用于荧光探针设计

BHQ-1 NHS（Black Hole Quencher-1 N-hydroxysuccinimide ester，BHQ-1活化酯）是一种高效非发光淬灭剂衍生物，广泛应用于荧光探针设计、FRET（荧光共振能量转移）体系构建及生物材料功能化研究中。BHQ-1分子核心为高度共轭的芳香体系，能够宽谱吸收可见光波段荧光染料的能量而不发光，实现高效非辐射淬灭。活化的NHS酯端为亲电子活性位点，能够与含氨基（–NH₂）的分子发生高效共价偶联，形成稳定酰胺键，为构建荧光探针、核酸标记及功能化材料提供可控化学途径。

化学特性

BHQ-1 NHS分子结构主要包括三部分：淬灭核心、柔性连接链和末端NHS活性酯。淬灭核心赋予分子宽光谱吸收能力（约480–580 nm），保证在FRET体系中高效淬灭荧光信号。柔性连接链将淬灭核心与活性位点隔离，减少对荧光染料的直接干扰，同时保证反应位点的可及性。NHS酯是一种亲电子官能团，能够在温和条件下快速与氨基反应，生成稳定的酰胺键，确保标记产物结构稳定、功能可控。

合成过程概述

BHQ-1 NHS的合成主要通过羧基活化策略实现，其关键步骤包括：

1. BHQ-1羧酸前体制备
   合成BHQ-1 NHS的前提是获得末端含羧基的BHQ-1酸衍生物。BHQ-1酸可在有机溶剂中溶解（如DMF、DMSO），保持分子核心结构稳定，为后续NHS活化提供可反应羧基。

2. 羧基活化
   羧基活化是BHQ-1 NHS合成的核心步骤，通常使用碳二亚胺类试剂（如EDC, 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide）与NHS（N-hydroxysuccinimide）协同作用。具体机理如下：

• EDC与羧基形成O-酰基异脲中间体，提高羧基的亲电子性。

• NHS进攻中间体碳原子，形成活化NHS酯，同时释放EDC副产物。
  该反应在干燥、无水条件下进行，通常采用室温或轻微加温，以防止芳香淬灭核心降解或副反应发生。

3. 反应监控与优化
   合成过程中可通过薄层色谱（TLC）或小规模HPLC监控BHQ-1 NHS生成情况。通过调整EDC、NHS及BHQ-1酸的摩尔比、反应时间及溶剂体系，可优化产率和纯度。过量EDC或反应时间过长可能导致副产物形成，影响活性。

4. 纯化与分离
   合成产物通常含有未反应前体、EDC副产物及游离NHS。纯化主要采用反相高效液相色谱（RP-HPLC），使用C18柱、梯度洗脱水-乙腈体系（含微量酸性调节剂）分离纯净BHQ-1 NHS。透析或凝胶过滤可用于去除低分子杂质，特别适用于水溶体系应用。

5. 表征
   纯化后的BHQ-1 NHS通过质谱（MS）、核磁共振（NMR）及紫外-可见光谱（UV-Vis）进行表征。MS可确认分子量，NMR可验证结构完整性，UV-Vis光谱可检测淬灭核心光学性质及溶液浓度。同时，HPLC可定量检测纯度，确保活性和实验可重复性。

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产品名称：BHQ-1 NHS

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

厂家：良林生物

产品目录

CY2标记溶血磷脂酰胆碱 CY2-LPC

CY2标记山梨糖 CY2-Sorbose

CY2标记羧甲基壳聚糖 CY2-Carboxymethyl chitosan

CY2标记脱硫生物素 CY2-Desthiobiotin

CY2标记万古霉素 CY2-Vancomycin

仅用于科研，不能用于人体。小编axc