AF532标记的α-Bungarotoxin，α-BTX-AF532，制备方法

AF532标记的α-Bungarotoxin，α-BTX-AF532，制备方法

AF532 标记的 α-Bungarotoxin（α-BTX-AF532）是一种常用于神经生物学和细胞成像研究的荧光标记探针。α-Bungarotoxin 是一种来源于蛇毒的多肽，分子量约 8 kDa，能够与烟碱型乙酰胆碱受体（nicotinic acetylcholine receptors，nAChRs）发生高度特异性的结合，主要识别受体 α 亚基结构域。由于其与受体结合后解离速度较慢，α-Bungarotoxin 被广泛应用于胆碱能受体的定位、分布及动态变化研究。Alexa Fluor 532（AF532）是一种常用的荧光染料，具有较高的荧光亮度和良好的光稳定性，其激发波长约为 532 nm，发射波长约为 554 nm，适用于共聚焦显微镜和荧光显微镜成像。将 AF532 共价连接至 α-Bungarotoxin 后，可在保持其受体结合特性的同时，实现直观的荧光可视化检测。

AF532 标记的 α-Bungarotoxin 制备通常采用活性酯偶联方法。首先需获得高纯度的 α-Bungarotoxin，一般由蛇毒粗提物经多步色谱分离纯化，如凝胶过滤色谱和反相高效液相色谱，以去除杂蛋白和小分子杂质。纯化后的 α-Bungarotoxin 溶解于不含伯胺的缓冲体系中，常用 0.1 mol/L 碳酸氢钠缓冲液（pH 8.0–8.5），以保证蛋白分子中的氨基处于适合反应的状态。

AF532 染料通常以 NHS 酯形式提供，该基团可与蛋白质分子中赖氨酸残基的 ε-氨基或 N 端氨基发生共价反应。操作时，在避光条件下将 AF532-NHS 酯溶解于少量无水 DMSO 中，并缓慢加入 α-Bungarotoxin 溶液中，轻柔混匀。染料与蛋白的摩尔比可根据实验需求进行调整，一般控制在 3:1 至 10:1 范围内。反应在室温下进行约 1–2 小时即可完成。

反应结束后，加入 Tris 或甘氨酸溶液以封闭未反应的活性酯。随后通过凝胶过滤色谱或高效液相色谱分离标记产物与游离染料，收集同时具有蛋白吸收峰和荧光信号的组分。最终产物可通过紫外-可见分光光度计计算标记度，并结合电泳或质谱分析其纯度。AF532 标记的 α-Bungarotoxin 可用于神经肌肉接头、受体分布及细胞表面受体成像等研究领域。

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产品名称：AF532标记的α-Bungarotoxin

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

厂家：良林生物

产品目录

BCN-PEG-NH2 环丙烷环辛炔聚乙二醇氨基

BCN-PEG-COOH 环丙烷环辛炔聚乙二醇羧基

BCN-PEG-Maleimide 环丙烷环辛炔聚乙二醇马来酰亚胺

BCN-PEG-Biotin 环丙烷环辛炔聚乙二醇生物素

BCN-PEG-SH 环丙烯环辛炔聚乙二醇巯基

仅用于科研，不能用于人体。小编axc