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Alexa Fluor 350-α-Bungarotoxin,荧光标记 α-眼镜蛇毒素的反应原理

2025-12-24 分享

Alexa Fluor 350-α-Bungarotoxin,荧光标记 α-眼镜蛇毒素的反应原理

一、中文名称
Alexa Fluor 350-α-Bungarotoxin 的中文名称通常为Alexa Fluor 350 荧光标记 α-眼镜蛇毒素,也可称作AF350 修饰 α-蛇毒素。其中,α-Bungarotoxin 是来源于眼镜蛇毒液的小型多肽蛋白,能够特异性结合尼古丁型乙酰胆碱受体(nAChR);Alexa Fluor 350(AF350)是一种蓝紫色荧光染料,具有高量子产率和良好光稳定性。该标记分子用于受体定位、荧光示踪以及神经科学研究。

二、分子结构特点
Alexa Fluor 350-α-Bungarotoxin 分子由三个主要部分组成:

  1. α-Bungarotoxin 多肽骨架:保持其特异性结合 nAChR 的生物活性。

  2. 柔性间隔(可选):部分制备方案中在荧光染料与蛋白质之间引入 PEG 或小型间隔链,以减少染料对蛋白质构象的干扰。

  3. Alexa Fluor 350 荧光端:通过化学偶联与 α-Bungarotoxin 的伯胺基或其他反应位点形成稳定共价键,提供蓝紫色荧光信号(激发约 346 nm,发射约 442 nm),适合多通道荧光成像。

三、反应原理
Alexa Fluor 350-α-Bungarotoxin 的标记反应原理主要基于活性酯与蛋白质伯胺基的亲核加成反应:

  1. 荧光染料活化
    Alexa Fluor 350 通常以 NHS-酯形式存在(AF350-NHS),即羧基通过 N-羟基琥珀酰亚胺活化形成高反应性的中间体。NHS-酯在水性缓冲液中对蛋白质伯胺基具有选择性反应性,可在温和条件下发生共价结合。

  2. 亲核加成反应
    AF350-NHS 中的活性羰基碳被 α-Bungarotoxin 上的伯胺基(主要赖氨酸残基)攻击,NHS 被置换,形成稳定的酰胺键。该反应温和,通常在 pH 7.2–7.5 的缓冲液中进行,避免蛋白质结构变性。

  3. 空间隔离作用
    部分反应设计中通过柔性 PEG 间隔或短链连接臂将荧光染料与 α-Bungarotoxin 分隔开,降低 steric hindrance,提高偶联效率并保持蛋白质结合活性。

  4. 反应选择性与稳定性
    NHS-酯对伯胺基的亲核性高,反应条件温和,几乎不影响蛋白质其他官能团,从而保证 α-Bungarotoxin 的功能活性。生成的酰胺键化学稳定,不易水解,适合长时间储存和使用。

四、应用优势
通过该反应,AF350-α-Bungarotoxin 可用于荧光显微镜、共聚焦显微镜及流式细胞分析,实现神经肌肉接头和中枢神经系统中 nAChR 的定位与动态观察。蓝紫色荧光波段与其他常用荧光染料有明显分离,可进行多通道成像。

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产品名称:Alexa Fluor 350-α-Bungarotoxin

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

厂家:良林生物

Alexa Fluor 350-α-Bungarotoxin

产品目录

CY5-Vincristine

CY5-长春新碱

CY3-脱硫生物素

CY3-DSB

CY3-γ-CEHC氨基丁酸

仅用于科研,不能用于人体。小编axc