CY5-AZIDE，CY5-叠氮基的制备方法

CY5-AZIDE，CY5-叠氮基的制备方法

CY5-AZIDE（CY5-叠氮基） 是一种将近红外荧光染料 CY5 与活性叠氮基团（–N₃）偶联形成的功能化分子。CY5-AZIDE 是生物正交化学和分子标记研究中常用的工具，可通过叠氮-炔基“点击”化学与含炔官能团的分子快速、选择性地偶联，从而实现荧光标记、分子示踪和功能化修饰。其分子定义为含叠氮官能团的近红外荧光染料衍生物，兼具光学示踪能力与化学反应活性。

在化学组成上，CY5-AZIDE 主要由两个部分构成：一是 CY5 荧光骨架，其共轭多亚甲基结构提供稳定的吸收和发射特性，同时在分子上保留活性羧基或胺基，便于后续官能团偶联；二是叠氮基（–N₃）官能团，通常通过羧酸、酰胺或其他活化基团与 CY5 偶联形成稳定的共价键。偶联结构设计合理，既保证荧光性能，又赋予分子选择性高、反应速率快的化学反应能力，使其能与炔基修饰的分子在温和条件下高效反应，生成 1,2,3-三唑环连接的荧光标记产物。

CY5-AZIDE 的制备方法通常包括三个核心步骤：前体活化、叠氮偶联及产物纯化。首先，在前体活化阶段，CY5 荧光骨架的羧酸基或其他活性位点需通过碳二亚胺类试剂（如 EDC）和 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）生成活性酯，以增强与叠氮胺或含叠氮的修饰试剂的偶联能力。反应通常在干燥的有机溶剂（如 DMSO 或 DMF）中进行，并通过缓冲体系调节 pH，以保证 CY5 分子光学稳定性和反应效率。

第二阶段是叠氮偶联反应，即将活化后的 CY5 前体与叠氮基试剂反应形成稳定的共价键。此过程通常在温和、无水或低水分条件下进行，以避免羧酸活性酯水解或副反应。反应的关键在于控制摩尔比、温度和时间，使大部分 CY5 分子均成功偶联叠氮基，同时保持荧光骨架的稳定性。偶联反应生成的主要化学键为酰胺键或其他稳定共价连接，保证分子在后续生物实验中的可靠性。

第三阶段为产物分离与纯化。偶联完成后体系中通常含有未反应的 CY5 前体、未反应的叠氮试剂及副产物，可通过反相高效液相色谱（HPLC）、柱层析或凝胶过滤进行分离。梯度洗脱可获得纯度高、单一成分的 CY5-AZIDE。纯化后，需通过质谱（MS）、核磁共振（NMR）、紫外-可见光谱及荧光光谱确认产物结构及光学性能，以确保叠氮标记成功且荧光特性保持完整。

CY5-AZIDE 的制备方法特点在于“活化—偶联—纯化”的三步策略。活化步骤保证荧光骨架与叠氮基高效偶联，偶联步骤在温和条件下选择性高、反应快速，纯化步骤确保产物稳定、适用于生物实验。偶联链设计合理，荧光骨架与叠氮基之间保持适当空间距离，减少空间位阻对荧光性能和后续点击反应的影响。

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产品名称：CY5-AZIDE，CY5-叠氮基

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

厂家：良林生物

产品目录

CY3.5-sucrose

CY3.5标记蔗糖

CY3.5-Transferrins

CY3.5标记转铁蛋白

CY3.5-UrolithinA

CY3.5尿石素A

仅用于科研，不能用于人体。小编axc