AF350-标记羊抗鼠免疫球蛋白(H+L),AF350 goat anti-mouse IgG的物理性质与稳定性
产品名称:AF350-标记羊抗鼠免疫球蛋白(H+L),AF350 goat anti-mouse IgG的物理性质与稳定性
一、稳定性与储存条件
1. 储存稳定性
长期储存:-20℃避光干燥保存,避免反复冻融(建议分装为单次使用量),有效期≥1年;4℃避光保存稳定期≥6个月。
运输要求:全程避光,使用冰袋保持低温(≤-15℃),防止光解和热降解。
加速老化试验:40℃放置1个月后,荧光强度衰减≤10%,纯度保持≥90%。
2. 光稳定性与化学稳定性
光敏感性:对紫外/蓝光敏感,需全程避光操作(如使用铝箔包裹容器),长时间光照(如日光/紫外灯)可能导致荧光淬灭,建议使用抗淬灭封片剂(如ProLong Gold)。
化学稳定性:NHS酯在碱性条件(pH 7-9)稳定,与伯胺反应高效;避免还原剂(如DTT、β-巯基乙醇)或高浓度亲核试剂,防止染料降解。
pH耐受性:在pH 4-10范围内荧光强度稳定,极端pH(<4或>10)可能导致抗体变性或荧光淬灭。
3. 热稳定性与生物相容性
热稳定性:37℃孵育24小时后荧光强度保持≥90%,适合常规实验条件;高温(>50℃)可能导致抗体变性。
生物相容性:细胞毒性低(IC₅₀>100μM),与生物分子(如蛋白质、核酸)偶联后活性保留良好,适用于体内外实验(如免疫荧光、流式细胞术、Western blot)。
二、操作与应用规范
1. 标记与纯化
反应条件:室温(20-25℃)孵育1-2小时,pH 7.5-8.5,避免高浓度染料(推荐染料:抗体摩尔比1:5至1:20),防止聚集或荧光淬灭。
纯化步骤:使用PD-10脱盐柱、Sephadex G-25凝胶过滤或透析(MWCO 3.5 kDa)去除游离染料,降低背景信号。
2. 应用场景适配
成像技术:适用于荧光显微镜、共聚焦激光扫描显微镜、流式细胞术、免疫组化(IHC)、原位杂交(ISH)等。
多色实验:与AF488(绿色)、AF594(红色)等联用,构建多色图谱,提升实验信息密度。
信号放大系统:在TSA(酪胺信号放大)中,AF350酪胺通过HRP催化沉积,增强信号强度,提高灵敏度。
3. 安全与操作注意事项
防护措施:操作时佩戴实验服、手套,避免皮肤接触或吸入;使用通风橱处理粉末或溶液。
废弃物处理:按生物危害废弃物规范处置,避免环境污染。
质量控制:通过HPLC、质谱、SDS-PAGE验证纯度与标记效率,确保实验可靠性。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

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