AF488 Hydroxylamine，AF488羟胺的分子特性与生物相容性

产品名称：AF488 Hydroxylamine，AF488羟胺的分子特性与生物相容性

一、核心分子特性

荧光光谱特性：

激发波长495-499 nm（紫外-可见光区），发射波长519-520 nm（绿色荧光），量子产率高达0.92，光稳定性为FITC的10倍，抗光漂白能力强，支持长时间（数小时）活细胞/组织成像。斯托克斯位移20-24 nm，减少激发光干扰，信噪比优异。

多色兼容性：绿色通道与红光（AF594）、远红光（AF647）及DAPI（核染色）无串扰，适配共聚焦显微镜、流式细胞仪等多平台。

化学结构特征：

羟胺基团（-NH-OH）通过共价键连接至AF488染料母核，保留荧光特性同时提供醛基反应活性。可与醛基（-CHO）发生Schiff碱反应形成肟键（-C=N-OH），经氰基硼氢化钠还原后形成稳定C-N键，实现特异性共价标记。

二、反应机制与标记效率

特异性反应：

醛基靶向：优先结合生物分子（如蛋白质、糖蛋白、核酸）中的醛基，例如通过高碘酸钠氧化后的糖链末端醛基、脂质过氧化产生的醛基或甲醛处理的蛋白。

反应条件：pH 5.0-7.0（弱酸性至中性）下反应活性最佳，室温下1-2小时完成标记；还原步骤（如NaBH₃CN）可增强键合稳定性，避免逆反应。

标记比例控制：

摩尔比优化：染料与目标分子（如抗体、蛋白）摩尔比通常为2-5:1，通过紫外光谱法（A280蛋白吸收与AF488特征峰A495吸光度）计算F/P值（每摩尔蛋白结合染料摩尔数），确保标记密度适中（避免过高导致蛋白聚集或活性丧失）。

纯化验证：反应后通过凝胶过滤（Sephadex G-25）、超滤管或亲和层析去除游离染料，确保标记物纯度，降低背景信号。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

关于我们：

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