DSPE-PEG-CREKA的制备方法

产品名称：DSPE-PEG-CREKA的制备方法

一、核心制备原理（迈克尔加成法）

选用马来酰亚胺修饰的 DSPE-PEG（DSPE-PEG-Mal） 与N 端巯基化的 CREKA 肽（HS-CREKA） 为原料，利用马来酰亚胺（Mal）与巯基（-SH）在中性条件下的特异性迈克尔加成反应，形成稳定的硫醚键（-S-C-），实现肽段与磷脂 - PEG 的偶联。

✅ 优势：反应特异性 100%、无需缩合剂、pH 适配范围窄（无副反应）、不破坏肽段活性，是肽类与 PEG 衍生物偶联的首选方法。

原料匹配：DSPE-PEG-Mal 分子量常用 2000/3400/5000，CREKA 肽为合成肽（纯度≥95%，HPLC 级），摩尔投料比建议DSPE-PEG-Mal:CREKA = 1:1.2~1.5（肽段稍过量，保证磷脂 - PEG 完全反应）。

二、试剂与仪器准备

1. 核心试剂（均为分析纯 / 生化级）

反应原料：DSPE-PEG-Mal（纯度≥95%）、HS-CREKA 合成肽（纯度≥95%，巯基未封端）

缓冲液：PBS 缓冲液（pH 6.5~7.0，0.01 mol/L，含 0.005 mol/L EDTA），EDTA 可螯合金属离子，防止巯基氧化二聚

溶剂：无水 DMSO（溶解 DSPE-PEG-Mal，亲脂性）、超纯水（稀释缓冲液，无杂质）

纯化试剂：透析袋（截留分子量 MWCO=3500/8000，根据 PEG 分子量选择）、无水乙醇 / 乙醚（沉淀）

辅助试剂：氮气（保护巯基，防止氧化）、三羟甲基氨基甲烷（Tris，调 pH）

2. 核心仪器

磁力搅拌器（室温低速搅拌）、分析天平（精度 0.01 mg）、pH 计、氮气吹扫仪

透析装置、冷冻干燥机、高效液相色谱（HPLC，C18 柱，质控用）、质谱仪（MS，验证分子量）

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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