5‑Carboxytetramethylrhodamine succinimidyl ester，5‑四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯

5‑Carboxytetramethylrhodamine succinimidyl ester，5‑四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯（5‑TAMRA‑SE），CAS：150810‑68‑7，分子量 527.60，为 5 位羧基单异构体四甲基罗丹明活性酯染料，区别于 5/6 混合异构体产物，单异构体拥有均一光谱行为，无异构体分离带来的批次波动问题。染料为暗红色固体，溶于 DMSO、DMF，激发波长 534 nm，发射波长 578 nm，呈现明亮橙红色荧光；罗丹明母核具备优秀抗光漂白性能，荧光几乎不受 pH 中性区间酸碱度扰动，不存在荧光素类染料酸性淬灭缺陷，适配复杂缓冲体系标记实验。琥珀酰亚胺酯基团在 pH7.2‑8.4 条件下选择性与伯氨基发生酰胺化，完成荧光共价接枝。

5‑TAMRA‑SE 更加适配多肽底物标记，相比于 6‑TAMRA 异构体，5 位羧基位置使得染料和多肽主链偶联之后，染料发色团远离多肽骨架，对多肽二级结构扰动更小，能够*大程度保留多肽原有理化行为与分子相互作用特性。多肽分子分子量小，空间紧凑，标记过程*易发生过度标记，多个荧光染料接枝到短肽链，引发分子内荧光自淬灭，荧光信号大幅衰减；因此多肽标记时染料摩尔投料建议控制 2‑5 倍区间，不可采用蛋白标记的高投料比。染料不溶于水，母液必须无水有机溶剂配制，再加入碳酸氢盐标记缓冲；NHS 酯在含水体系水解速度快，反应孵育时间不宜过长，减少水解副产物积累。

标记结束之后，借助反相色谱完成多肽‑染料共轭物纯化，依靠紫外双波长同时采集多肽吸收峰与染料特征吸收峰，追踪收集目标组分；可通过分光光度法计算每个多肽分子上染料标记数目。该染料标记产物适配凝胶荧光扫描、毛细管电泳、荧光光谱测试、共聚焦荧光检测等多种分析平台。试剂‑20℃避光干燥密封储存，建议分装单次使用规格，染料溶液光照条件容易发生光降解，配置母液全程避光操作。作为单异构体多肽专用荧光标记试剂，5‑TAMRA‑SE 为荧光多肽合成、多肽分子相互作用体外研究提供性能稳定的橙红色荧光标记方案。

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