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Biotin LCA，生物素化小扁豆凝集素的糖链识别特征与糖组学探针应用

2026-09-09 分享

Biotin LCA（生物素化小扁豆凝集素），英文别名Biotin‑Lens Culinaris Agglutinin，Biotin‑LcH，Biotinylated Lentil Lectin，是来源于小扁豆（Lens culinaris）的C型凝集素经过生物素共价修饰得到的糖链识别探针，属于植物来源糖结合蛋白，可特异性识别带有核心岩藻糖修饰的N‑糖链，对α‑D‑甘露糖残基也具备亲和能力，是糖蛋白糖基化分析的核心工具试剂。

天然LCA凝集素是多亚基蛋白，多价结合结构让它对目标糖链具备高亲合力；通过NHS‑Biotin对蛋白表面赖氨酸残基进行修饰，引入生物素基团，不破坏糖识别结构域，保留糖链结合活性。生物素基团可以和链霉亲和素系统配对，后续偶联荧光基团、酶标记物或者固相微球，实现信号放大或者靶标糖蛋白富集，这套组合广泛应用于糖组学、细胞糖表型分析领域。和伴刀豆球蛋白ConA相比，LCA识别谱更窄，优先识别核心岩藻糖化N‑聚糖，对区分不同糖基化亚型具备更高分辨能力。

该试剂在凝集素芯片实验中发挥重要作用，将Biotin‑LCA固定在链霉亲和素修饰芯片载体上，构建凝集素微阵列，用于解析样本糖蛋白的糖链谱，对比不同组别样本糖基化差异；也可用于印迹实验，转印膜上的糖蛋白经过Biotin‑LCA孵育，再结合链霉亲和素‑HRP或者链霉亲和素‑荧光探针，完成糖蛋白的可视化检测，不需要复杂的糖链解离操作，直接完成凝胶、转印膜上糖蛋白分析。

细胞层面可用于流式细胞术与组织免疫化学，标记细胞表面带有核心岩藻糖修饰的糖蛋白，表征细胞表面糖表型差异；在亲和富集实验中，借助链霉亲和素磁珠，捕获LCA结合的糖蛋白，后续开展质谱鉴定，解析糖蛋白组。凝集素结合依赖钙离子，缓冲体系需要维持合适Ca²⁺浓度，螯合剂EDTA会完全破坏糖结合活性，实验缓冲液需要规避高浓度螯合剂。蛋白类试剂避免反复冻融，冻干品复溶建议使用含钙中性缓冲溶液。作为糖链特异性探针，Biotin‑LCA为糖蛋白后修饰研究提供高特异性检测手段。

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